1.用窗帘遮盖光线,关闭房间内的灯光,除去显微镜的防尘罩,确保显微镜灯室通风良好、无遮盖。装上汞灯灯箱,并转动灯箱卡圈上的拨杆,将灯箱与镜臂衔接。
2.将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座,再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。
3.翻开电源开关,电压表显现出电源电压,如电源电压动摇不大于额定电压值的±5%,即可按下启动开关点燃汞灯,如因天气太冷或电压不稳定等缘由,一次启动未点燃汞灯,能够多启动几次。待超高压汞灯弧光到达稳定状态并到达发光效率,即可开端工作。
4.灯泡的调节:
(1)任选一块标本放在载物台上;
(2)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激起滤色片组转入光路,并将10X荧光物镜转入光路;
(3)调理粗微调手轮,将标本像调焦明晰;
(4)前后推进垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆,使视场光栏成像明晰,转动视场光栏拨杆将视场光栏收小,调理视场光栏调中螺钉使视场光栏居中,然后再将视场光栏开至;
(5)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路,前后调理灯箱上的聚光镜拨杆,使汞灯的弧光在视场内成像明晰;
(6)调整灯箱上的灯泡程度调理螺钉和垂直调理螺钉,使汞灯的弧光居中;
(7)调整反光镜程度调理螺钉和垂直调理螺钉,使光源的反射像与汞灯的弧光分开;
(8)转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路,此时视场照明平均。
5.荧光察看:
(1)将荧光染色标本放到载物台上。
(2)将10X平场物镜或40X荧光物镜转入光路,调理载物台纵横挪动手轮,将标本移入光路。
(3)转动滤光片转换拨轮,将荧光染色标本所需求的激起滤光片组转入光路。激起滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。滤光片选择正确与否,是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时,必需恪守斯托克斯定律:激起滤光片的透射波长<双色束别离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长。
由于激起滤光片、双色束别离器和阻断滤光片,出厂时已按其用处和自身的光学特性停止了严厉的组合匹配,在察看和摄影时,只需选择滤光片组即可。
(4)调理粗调手轮,当看清荧光图像轮廓后,再用微调手轮调焦,直至看到明晰的荧光图像。
(5)当需求得到较强的荧光图像时,可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路,可取得较亮堂的荧光图像。
(6)当需求运用40X或100X荧光物镜察看时,应在标本和物镜间加上甘油,油中不能有影响察看的小泡或杂质。运用时可使甘油渐渐浸润一会儿,然后缓缓左右来回转动物镜转换器以扫除气泡。
6.荧光显微摄影—显微镜摄像头
由于荧光图像普通均较明场察看暗得多,所以停止荧光显微摄影需求较长的曝光时间,在曝光时应留意防止仪器震动。
荧光显微镜摄影技术关于记载荧光图像非常必要,由于荧光很易褪色削弱,要即时摄影记载结果。办法与普通显微摄影技术根本相同。