荧光显微镜及荧光数码成像拍照的选择及注意事项的介绍

荧光显微镜是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体，使之受激发后而产生长波长的荧光，然后观察。荧光显微镜广泛应用于生物，医学等领域等。

⑴荧光显微镜—般分为透射和落射式两种类型。

a.透射式激发光来自被检物体的下方，聚光镜为暗视野聚光镜，使发光不进入物镜，而使荧光进入物镜。它在低倍情况下明亮，而高怕仅暗，在注漫和淘中时，较谁操作，尤以低倍的照明被围准于确定，但能得到很暗的视野背景。透射式不使用于非透明的被检物体。

b.落射式目前几乎被淘汰，新型的荧光显微统多为落射式，光源来自被检动依的上方，在光路中具有分光镜，所以对透明和不适明的被检物休体都适用。由于物确起了聚光接的作用，不仅便于操作，而且从低倍到高倍，可以实现整个视场的均匀照明。

(2)荧光镜检术的注意事项

a.激发光长时间的照射，会发生光的衰减和淬灭现象，因此尽可能缩短观察时间，暂时不观察时，应用挡板遮盖发光。

b.作油镜观察时，应用无荧光镜油"。

c.做荧光实验，普遍荧光比较弱，应在较暗的室内进行。电源可装稳压器，否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命，也会影响效果，目前新研究领域都会用到荧光显微镜，如基因原位杂交FISH)等。

荧光拍摄通常需要使用制冷型CCD（成像系统相机），因为制冷CCD可以减少背景噪声，对弱荧光信号采集很有好处，特别是像单分子成像。采集强光信号不一定要用制冷CCD，可使用黑白相机，彩色相机不适合荧光采集，因为其感光度低、分辨率也低，除非荧光信号很高，对分辩率要求不高或者使用双通道滤色片时才适合用彩色相机。